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2011、1.1DNA重组技术的基本工具

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基因工程的概念基因工程基因工程(基因拼接技术基因拼接技术或DNADNA重组技重组技术):):按照人们的意愿,把某一生物的某按照人们的意愿,把某一生物的某基因基因提取提取出来,加以出来,加以修饰改造修饰改造,然后放到,然后放到另一种生物另一种生物的细的细胞里,定向地改造另一种生物的遗传性状。胞里,定向地改造另一种生物的遗传性状。•基因工程培育抗虫棉的简要过程:基因工程培育抗虫棉的简要过程:苏云金芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌提取抗虫基因抗虫基因导入棉花细胞棉花细胞抗虫棉花抗虫棉花组织培育+载体1.1DNA重组技术的基本工具工具1限制性核酸内切酶──“分子手术刀”1.基因工程中的基因工程中的“分子手术刀分子手术刀”是指是指,目前有四千种目前有四千种,它们全部提取于它们全部提取于生物。据酶切特点,生物。据酶切特点,可将其分为两类:一类是切割部位可将其分为两类:一类是切割部位无特异性无特异性;另一类;另一类是只能在是只能在特定的核苷酸序列特定的核苷酸序列上切割,这种特定的核苷上切割,这种特定的核苷酸序列都是酸序列都是结构。在基因工程中使用最多是后一结构。在基因工程中使用最多是后一类酶。后一类限制酶在切割部位进行切割时,有类酶。后一类限制酶在切割部位进行切割时,有错位错位切和平切平切两种。切割时都是切断两种。切割时都是切断两个核苷酸之间两个核苷酸之间的.键,其结果是其结果是DNA被截成两段并形成新的末被截成两段并形成新的末端,新末端有两种即新末端有两种即和。2.EcoRⅠ限制酶能识别限制酶能识别序列,并在序列,并在之间切开。之间切开。SmaⅠ限制酶能识别限制酶能识别。序列,并在序列,并在之间切开。之间切开。3.CCAGAATTCAGAGCCCGGAATTGCCGGTCTTAAGTCTCGGGCCTTAACGG上述上述DNA片段在片段在EcoRⅠ限制酶限制酶/SmaⅠ限制酶切割后限制酶切割后分别是分别是段和段和段.GAATTCG和ACCCGGGG和C限制酶限制酶回文回文微磷酸二酯磷酸二酯平末端末端黏性黏性末端末端21

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