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5[1].3血红蛋白的提取和分离 课件(人教版选修一)

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文档简介:

课题3血红蛋白的提取和分离关于血红蛋白的提取和分离的基础知识1.凝胶色谱法分配色谱法相对分子质量的大小凝胶色谱法也称作____________________,是根据______________________分离蛋白质的有效方法。2.缓冲溶液酸碱1~2种缓冲剂水使用比例(1)缓冲溶液的作用:在一定范围内能够抵御______和______对溶液pH值的影响。(2)配制:缓冲溶液通常由__________________溶解于________中配制而成的。调节缓冲剂的________________就可以得到不同pH值范围内的缓冲液。3.电泳琼脂糖凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳(1)概念:电泳是指__________在电场的作用下发生的______过程。带电粒子迁移(2)两种常用的电泳方法是__________________和_______________________,在测定蛋白质分子量时通常使用____________________________。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带_______的多少以及____________等因素。净电荷分子的大小SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳血红蛋白的提取和分离的实验1.流程:蛋白质的提取和分离一般分为四步:________、粗分离、________和纯度鉴定。纯化2.样品处理:(1)红细胞的洗涤:目的是______________,以利于后续步骤分离纯化。去除杂蛋白甲苯血红蛋白的水溶液(2)血红蛋白的释放:在蒸馏水和________的作用下,红细胞破裂释放出血红蛋白。(3)分离血红蛋白溶液:将混合液离心后,试管中的溶液分为4层,第3层是红色透明液体,这是_____________________。样品处理3.粗分离:透析可以去除样品中____________________的杂质,或用于更换样品的________________。4.纯化:凝胶色谱操作。分子量较小缓冲液分离的种类相对分子质量直径大小运动方式运动速度运动路程洗脱次序大分子物质大大于凝胶颗粒空隙,分子不能进入凝胶颗粒内部,只能分布在颗粒之间垂直向下的运动较快较短先小分子物质小小于凝胶颗粒空隙,分子可以进入凝胶颗粒内部垂直向下的运动,无规则的扩散运动较慢较长后凝胶色谱法分离蛋白质的原理

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