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5[1].1 dna的粗提取与鉴定 课件(人教版选修一)

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文档简介:

专题重点专题难点①DNA的粗提取以及鉴定的原理及步骤②PCR技术的基本操作和应用③蛋白质的提取和分离的基本过程④用电泳法分离蛋白质的基本操作①理解DNA粗提取各个步骤的原理和目的②PCR技术的原理③体内DNA复制与PCR技术的区别④电泳法分离蛋白质的基本原理专题5DNADNA和蛋白质技术课题1DNA的粗提取与鉴定DNA的提取原理溶解度耐受性DNA与杂质的________不同,DNA与杂质对酶、高温、洗涤剂的________不同。DNA粗提取的实验设计(1)材料的选取:选用DNA含量相对____________的生物组织,如鸡血、菜花、洋葱等。NaCl溶液NaCl溶液(2)破碎细胞(以鸡血为例):鸡血细胞,加蒸馏水,用________搅拌,用________过滤,收集滤液。玻璃棒纱布(3)去除杂质:利用DNA在不同浓度的__________中溶解度不同,通过控制__________的浓度去除杂质。(4)DNA的析出:将处理后溶液过滤,加入与滤液体积相等的、冷却的________(体积分数为95%)。酒精溶液较高DNA的鉴定二苯胺试剂蓝色DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中,加入4mL的_______________,沸水中加热5min,溶液变成_________。DNA提取材料和实验用具的选择1.实验材料的选择原则是选用DNA含量高的生物组织。有些材料不宜选用,如哺乳动物成熟红细胞(猪、牛、羊的血细胞)无细胞核,无法提取DNA。实验一般选用鸡血或菜花作为实验材料。2.鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。因此,实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,这样可以减少提取过程中DNA的损失。实验操作原理1.细胞破碎的原理动物细胞吸水涨破2.用不同浓度的NaCl溶液提取DNA的原理DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最小3.提纯DNA的原理酒精可以溶解蛋白质等杂质,而DNA不溶于酒精;60~80℃可以使蛋白质变性,而DNA在80℃以上才会变性;利用蛋白水解酶的专一性可以水解蛋白质4.鉴定的原理在沸水浴条件下DNA遇二苯胺呈蓝色DNA的粗提取与鉴定实验中涉及的原理

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